天根生化科技(北京)有限公司 品牌商

16 年

手机商铺

商家活跃:
产品热度:
品牌商

天根生化科技(北京)有限公司

入驻年限:16 年

  • 联系人:

    TIANGEN

  • 所在地区:

    北京

  • 业务范围:

    实验室仪器 / 设备、技术服务、试剂、耗材

  • 经营模式:

    生产厂商

在线沟通

公司新闻/正文

【miRNA常见误区】茎环反转+SYBR定量?1+1<2

人阅读 发布时间:2016-09-29 15:02

miRNA的荧光定量检测是几乎所有miRNA课题都避不开的实验过程。在提取miRNA之后,反转录可以用加尾法或茎环法,荧光定量可以采用染料法(SYBR Green)或探针法。为了增加反应的特异性,同时为了节省探针昂贵的合成费用,小明同学独创了一种实验流程:茎环法反转录,染料法荧光定量。

然而,11不一定等于2,两者兼顾的后果往往是两者都做不到位。就像我们提取RNA一样,过程的每一个步骤都需要去除RNase,而绝不是第一步去除了,后面就可以不管。对于miRNA的家族来说,彼此之间碱基差异很少,即使是茎环法也不能保证只反转家族中的某一条miRNA,所以最终的cDNA仍然有很大可能是混合物。此时,只有使用探针法才能严格保证特异性。如果后续采用染料法,那么前面的茎环法反转录的意义就大打折扣了。

另一方面,加尾法特异性低这个概念只是相对的。对于不同miRNA来说,最少要相差1个碱基,所以只要能完美区分单个碱基的差别,这个特异性就足够了。那么加尾法反转加染料法定量,其特异性究竟如何呢?我们来举个栗子。

另外,茎环法反转录还有很多其他的问题,最重要的是检测通量太低。

了解使用茎环法的血泪史,可单击这里

 

 

——小明!你既浪费了时间又浪费了经费,还没有拿到理想的结果!自觉点!

——老师,给我3个小时,我能用新试剂将功补过!

——先回来!什么试剂这么快?

 

miRcute增强型miRNA cDNA第一链合成试剂盒(KR211)

——配方升级,让miRNA反转录更快速、更准确

 省时省力:A尾反应和反转录反应合二为一,一步完成miRNA cDNA的第一链合成。

 区分度强:只针对单链RNA进行加尾和反转录,免除miRNA前体的干扰。

  通量高:一次反应即可反转录所有的miRNA及内参。

miRcute增强型miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green)(FP411)

——采用全新的化学修饰DNA聚合酶及优化的体系,特异性更好

 灵敏度高:可在pg级的总RNA中检测到目的miRNA

 特异性强:识别单碱基的差异,完美区分家族中的不同miRNA

 通用性好:适用于各种类型的荧光定量PCR仪。
 

上一篇

白送的iPhone、Kindle、拉杆箱、话费…你想要吗?

下一篇

【miRNA培训班】想提高miRNA实验技能的小伙伴看过来!

更多资讯

询价列表

暂时没有已询价产品

快捷询价 发送名片
    当你希望让更多商家联系你时,可以勾选后发送询价,平台会将你的询价消息推荐给更多商家。